背景:
胰蛋白酶(Trypsin)属于丝氨酸蛋白酶家族,能特异性切割多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基。胰蛋白酶原由胰腺分泌,受肠激酶或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶,是肽链内切酶。它不仅起消化酶的作用,而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体,起活化作用,是特异性最强的蛋白酶。
产品包装:
Rhinogen® QuickTM Trypsin(Sequencing Grade)包装规格如下:
目录号 |
规格 |
QIP-012-A |
20μg |
配套试剂:
试剂 | 目录号 | 规格 |
QuickTM反应增强剂 | EB17-A | 3×1 vial,0.5mg/vial |
Quick™ Trypsin酶及QuickTM反应增强剂以冻干粉形式提供。
产品来源:
Rhinogen® QuickTM Trypsin(Sequencing Grade)是利用重组大肠杆菌系统表达生;产并经过多步层析纯化得到的重组胰蛋白酶,其氨基酸序列与猪源胰蛋白酶序列同源,分子量大小约为25kDa。
产品质量:
SDS-PAGE分析,纯度≥95%;没有检测到污染的蛋白酶活性。
产品特性:
最适反应pH:7.0~8.0。
保藏条件:
采用冰袋运输。收到产品后请立即将置于-20℃,密封防潮。酶溶解后,-70℃存放;若溶解后存于2-8℃,需在24hr内使用完毕;QuickTM 反应增强剂冻干粉溶解后,-70℃可储存一个月,2-8℃可储存一周。酶液及QuickTM 反应增强剂溶解后避免室温下长时间放置,可进行分装,避免反复冻融。
应用:
1. 在数分钟内完成抗体或蛋白的完全快速消化;
2. 肽谱图、肽指纹谱或蛋白序列分析;
3. 蛋白质组学研究;
4. 增加蛋白质序列覆盖率;
5. 改善溶液内酶解方案。
产品特点:
Rhinogen® QuickTM Trypsin(Sequencing Grade)是一种高度纯化和非常稳定的重组蛋白酶,具有稳定性高、比活性高等特点。适用于蛋白质组学研究中肽谱图、肽指纹谱或蛋白序列分析。
1. 高纯度:SDS-PAGE分析,纯度≥95%;
2. 高一致性:每批产品都经过严格的质量控制,以实现产品批间稳定性;
3. 不自切:重组甲基化修饰突变胰蛋白酶,不自切;
4.无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料;
5. 超高效率:可显著缩短蛋白质酶解时间,在同一天内完成所有酶解工作,兼容液相色谱(LC)和MS分析。
操作说明:
1. 胰蛋白酶的使用量为胰蛋白酶:目的蛋白=1:20~1:100(w/w),最适pH为7.0~8.0;
2. 反应体积可以按比例放大或缩小;
3. 在酶切反应体系中添加1mM CaCl2,可以提高胰蛋白酶的活性;
4. 反应结束后,取少部分反应体系进行SDS-PAGE或者RP-HPLC检测,确认酶切效果。剩余反应体系置于冰浴或者冻存。若酶切不完全,则取出反应体系,置于37℃继续进行反应;
5. 对于不同的蛋白样品,需要实验摸索最适的酶浓度及反应时间。可用50mM NH4HCO3或者pH7.0-8.0的缓冲溶液进行酶液稀释;
6. 本产品仅供研究使用,不适用于人或动物的诊断及治疗用途。