背景：

      临床输液反应以热原反应危害最大，发生率最高。内毒素（即革兰氏阴性菌细胞壁的脂多糖分子，lipopolysaccharide，LPS）是研究最透彻也是最常见的生物热原，注射即使是pg 级别的内毒素，也会导致病人严重的热原反应，引起人体发热、休克甚至死亡。内毒素普遍存在且不易灭活，对制药和医疗器械行业是一个挑战。因此，灵敏可靠的内毒素分析技术是非常必须的。 

      自 1970 年代起鲎试内毒素检测方法开始应用于医药领域，很快被世界各国广泛采用并将其定为法定的细菌内毒素检查法。传统鲎试剂分为凝胶法和光度法两种，而光度法又分为浊度法和显色法，其中以动态显色法的检测灵敏度范围最广，且能定量检测内毒素含量并能提供数据审计追踪记录。 

      动态显色法鲎试剂在内毒素存在下，其裂解物将开始裂解显色底物，导致溶液变黄。溶液变色所需的时间与存在的内毒素含量成反比。然后，可以从标准曲线来计算未知样品的浓度。但作为传统鲎试剂的一种，动态显色法鲎试剂依然存在因生产原料所无法避免的缺点。例如，非特异性干扰问题：鲎试剂除了能与内毒素反应外，还会与(1-3)-β-D- 葡聚糖反应，造成假阳性结果。再比如，批次稳定性问题：鲎试剂采用海鲎血液作为生产原料，由于季节、地域等差异，使得鲎试剂的批次差异成为常见现象等。 

      随着生物技术的进步，重组蛋白生产技术逐步取代了天然提取技术。为了保护鲎资源，并能排除旁路 G 因子引起的非特异性干扰等传统鲎试剂的劣势，通过重组表达开发一种不依赖于动物鲎来源，同时能兼顾高灵敏度且可定量检测内毒素的的试剂盒更是目前的发展趋势。

概述：

      Rhinogen^® 重组鲎试剂（Recombinant Cascade Reagent，rCR）采用基因重组技术表达鲎血细胞中的 C 因子（Factor C）、B 因子（Factor B）和凝固酶原（Proclotting enzyme）；当重组 C 因子与内毒素结合并被激活之后，从而激活重组 B 因子，再由活化后的 B 因子激活重组凝固酶原，使其转变成具有生物活性的凝固酶，最后凝固酶识别并催化下游带显色基团的底物产生显色反应。显色反应的强度和内毒素浓度成正相关，从而定量检测内毒素。

图 1. Rhinogen^® 重组鲎试剂内毒素检测试剂盒反应原理

试剂包装：Rhinogen^® 重组鲎试剂内毒素检测试剂盒包装规格如下：

试剂盒组分	货号	规格
	RAF-03	30T×2vial
重组鲎试剂冻干粉	RAF-03A	2vial
复溶缓冲液	RAF-03B	2vial
无热原水	RAF-03C	2vial

产品特性：

      Rhinogen^® 重组鲎试剂内毒素检测试剂盒是一种不依赖于动物源性成分，灵敏度高、特异性高、可稳定且持续提供的内毒素测定产品，具有如下特性： 

      1.与动态显色法内毒素检测试剂操作流程一致，检测设备相同，分析方法一样；
      2.检测方便，单步复溶；

      3.在 96 孔板中检测，操作方便，且高通量；

      4.灵敏度范围为 0.005EU/ml~5EU/ml；

     5.内毒素特异性，无 G 因子旁路干扰，避免结果出现假阳性；

      6.消除了对动物源试剂的依赖，且符合 3R 的替代原则，提供更高的供应安全性

      7.重组表达生产，产品批间一致性良好；

      8.本试剂盒可用于人用和动物用注射药物（如化学药品、放射性药物、抗生素类、生物制品等）及医疗器械（如透析液、植入式器械等）的原辅材料、中间产品、放行产品的内毒素检测。 

保存条件：

      采用冰袋运输。收到试剂盒后，请立即置于 2℃~8℃储存。