背景：

      IdeS是仅在铰链区下方的一个特定位点裂解IgG以产生F（ab'）2和Fc片段的免疫球蛋白降解酶。Rhinogen^® IdeS protease是利用E.coli系统重组表达生产，并经过分子改造得到的重组IdeS蛋白。其含有His标签，在酶切完成后很容易从酶切反应体系中分离去除。IdeS蛋白酶在生理条件下切割IgG，从而保持免疫反应性。在pH 6.0~8.0范围的常用缓冲液中，IdeS蛋白酶可有效切割多种抗体。经过改造后的IdeS蛋白酶具有更高的酶活和更广的底物特异性，除可酶切人IgG1~4、猴、羊、兔IgG外，还对小鼠IgG2a、IgG3具有特异性切割活性。

包装规格：

     Rhinogen^® IdeS protease包装规格如下：

目录号	规格
QIP-001-A	5000U
QIP-001-B	5×5000U
QIP-001-C	1000U

     QIP-001是冻干粉制剂产品，制剂缓冲液为20mM Tris，50mM NaCl，1mM EDTA，pH 7.5。

产品来源：

     Rhinogen^® IdeS protease是利用E. coli表达系统重组表达生产并经过分子改造得到的重组IdeS蛋白酶，分子量大小约为36kDa。

产品质量：

     SDS-PAGE分析，纯度≥95%。

产品特性：

     最适pH为6.0~8.0。

酶活定义：

     1个酶活力单位定义：37°C条件下，30分钟内酶切1μg重组单克隆IgG所需要的酶量。

储存条件：

     1. 采用冰袋或干冰运输， 收到产品后请立即将其置于-30℃至 -10℃冻存；

     2. 使用前，用无菌水溶解IdeS protease冻干粉末。溶解后，2~8℃存放，若无菌取用，有效期为30天。

产品特点：

     Rhinogen^® IdeS protease是一种高度纯化和非常稳定的重组蛋白酶，具有稳定性高、比活性高等特点。适用于重组抗体药物的结构表征分析。

     1. 高比活性：有效切割抗体下铰链，获得F(ab’)2和Fc片段；

     2. 广泛的底物特异性：除对人IgG1~4、猴、羊、兔IgG有酶切活力外，还对小鼠IgG2a、IgG3具有特异性切割活性；

     3. 无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料；

     4. 高稳定性：每批产品都经过严格的质量控制，以实现产品批间稳定性。

应用：

     特定位点裂解IgG以产生F(ab’)2和Fc片段。

使用建议：

     1、试剂准备：
               1） 使用前，请将Rhinogen^® IdeS protease取出，10000rpm离心10秒，确保所有干粉都在管底；
               2）用去离子水将Rhinogen^® IdeS protease干粉溶解成50units/μl溶液。

     2、推荐使用方法：

     1）在消化缓冲液或其他相容缓冲液中加入所需量的IgG（0.5~10mg/ml）；

     2）将Rhinogen^® IdeS protease加入至IgG样品中；

     注意：每1μg IgG加1 unit IdeS蛋白酶进行消化；例如，加入1μl（50 units）IdeS溶液以消化50μg的IgG；

     3）在37℃条件下孵育30~60分钟。

操作说明：

     Rhinogen^® IdeS protease能有效地切割人类，人源化，嵌合，羊，兔和猴IgG，并对小鼠IgG2a和IgG3具有较高活性。Rhinogen^® IdeS protease也能切割许多Fc-融合蛋白以及抗体药物偶联物（antibody drug conjugates ，ADCs）；

     1. IdeS protease不能切割小鼠IgG1 / IgG2b，大鼠，猪，牛或山羊IgG。此外，它不能切割非IgG同种型，包括IgA，IgM，IgD和IgE；
     2. 理想的IgG浓度应在0.5~10mg/ml的范围内；
     3. 酶切反应缓冲液pH为6.0~8.0，最适pH6.5，且NaCl浓度不宜过高，建议消化缓冲液为10mM sodium phosphate，10mM NaCl，pH6.5；
     4. 对于小鼠IgG2a和小鼠IgG3的切割，增加IdeS蛋白酶的量（建议5倍至10倍作为起点）和孵育时间（2小时至过夜）；
     5. 通过SDS-PAGE很容易确定IgG的切割；
     6. IdeS protease具有组氨酸标签，便于从酶切反应体系中去除；
     7. 将消化产物与Protein A珠孵育30~60分钟后，可以获得纯化的F(ab’)2片段；
     8. 本产品仅供研究使用，不适用于人或动物的诊断及治疗用途。