背景：

       糜蛋白酶（chymotrypsin）也叫胰凝乳蛋白酶，属于丝氨酸蛋白酶家族，能专一性水解芳香族氨基酸羧基形成的肽键。糜蛋白酶原由胰腺分泌，随胰液进入小肠后，在Arg 15 和Ile 16之间（按Bovine chymotrypsin A 序列编号）被胰蛋白酶切为通过二硫键连接的两部分，随后糜蛋白酶在Leu 13 酶切去短肽Ser 14-Arg 15，在Tyr 146 和Asn 148 酶切去短肽Tyr 147-Asn 148，形成由二硫键相连的三条肽链并具有生物活性。

       Rhinogen^® Chymotrypsin (Sequencing Grade)是利用重组毕赤酵母系统重组表达并经过多步层析纯化得到重组糜蛋白酶原，通过激活（胰蛋白酶和自身水解）后获得的活性糜蛋白酶，纯度≥95%，如下图。其氨基酸序列与人源糜蛋白酶序列完全一致，分子量大小约为25kDa。可选择性水解芳香族氨基酸如：酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸的C 端形成的肽键，也可以较慢的速率缓慢水解由亮氨酸和蛋氨酸形成的肽键，还可作用于敏感氨基酸形成的酯。

包装规格：

       Rhinogen^® Chymotrypsin (Sequencing Grade)包装规格如下：

       QIP-002是以冻干粉形式提供。

产品来源：

       Rhinogen^® Endoproteinase Lys-C是利用重组E. coli表达系统表达的重组赖氨酰内切酶，分子量大小约31±3.1kD。

产品质量：

       最适pH为7.0-9.5。

储存条件：

       1. 采用蓝冰保温运输，收到产品后请立即将酶置于-20℃，密封防潮。

       2. 使用50mM HAc溶解后，2-8℃存放，2天内使用；或溶液分装后存于-20℃以下，有效期24个月。避免室温下长时间放置，避免反复冻融。

产品特点：

       Rhinogen^® Chymotrypsin (Sequencing Grade)是一种高度纯化和非常稳定的重组蛋白酶，具有稳定性高、比活性高等特点。适用于蛋白质组学研究中肽谱图、肽指纹谱或蛋白序列分析。

       1. 高纯度：宿主蛋白残留小于生物制品限度要求，纯度≥95％；

       2. 无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料； 

       3. 高稳定性：每批产品都经过严格的质量控制，以实现产品批间稳定性；

       4. 高比活性：比活（单位/mg）≥2000USP units/mg。

应   用：

       1. 蛋白质组学研究；

       2. 肽谱图、肽指纹谱或蛋白序列分析。

使用建议：

       1、试剂准备：

       1）使用前，请将Rhinogen^®  Endoproteinase Lys-C取出，10000rpm离心10秒，确保所有干粉都在管底；

       2）用50mM HAc 将Rhinogen^® Chymotrypsin (Sequencing Grade)干粉溶解成1-10mg/ml溶液。

       2、推荐使用方法：

       在蛋白消化中，用50mM 或100mM 的NH4HCO3 溶解目的蛋白，然后加入一定量的酶溶液，使酶量：目的蛋白（质量比）=1：50。最适反应温度为30℃，温度超过37℃后酶会发生自切。

       注意：对于不同的蛋白样品，需要实验摸索最适的酶浓度及反应时间。

操作说明：

       本产品仅供研究使用，不适用于人或动的物诊断及治疗用途。